原创： 徐瑞平
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艾滋病，即获得性免疫缺陷综合征(Acquiredimmunodeficiency syndrome，AIDS)艾滋，其病原体为人类免疫缺陷病毒(Humanimmunodeficiency virus，HIV)，亦称艾滋病病毒。
HIV广泛存在于感染者的血液、精液、阴道分泌物、乳汁、脑脊液、有神经症状的脑组织液中，其中以血液、精液、阴道分泌物中浓度最高。
艾滋病的传播途径及需查人员：
艾滋病的传播途径主要包括性接触(包括同性、异性和双性性接触)、血液及血制品(包括共用针具静脉注射毒品、介入性医疗操作、纹身等)和母婴传播(包括经胎盘、分娩时和哺乳传播)。
哪些人需要查HIV？
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1．必查人员：我国规定婚前、孕产妇、手术前、有创性检查前及献血员、输血者都要进行HIV抗体筛查。
2．有HIV感染的急性期或慢性期症状者。
3．HIV暴露者（如高危性行为、注射器针头刺伤等）。
4．有过输血史，非正规医疗机构侵入性检查、治疗史又高度怀疑自己感染艾滋病者。
5．对HIV高危险人群应每年检测一次。
哪些人是高危险人群？
（1）男同性恋或双性恋者
（2）与别人共用针筒、针头注射毒品的吸毒者
（3）输入未经病毒检测的血、血浆或血液制品
（4）多性伴侣人群
（5）性伴有HIV感染、双性恋或注射吸毒
（6）与HIV感染状态不明者发生无保护性行为者
HIV/AIDS的实验室检测：
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HIV/AIDS的实验室检测主要包括HIV抗体检测、HIV核酸定性和定量检测、CD4＋T淋巴细胞计数、HIV基因型耐药检测等。HIV-1/2抗体检测是HIV感染诊断的金标准；HIV核酸定量(病毒载量)和CD4＋T淋巴细胞计数是判断疾病进展、临床用药、疗效和预后的两项重要指标；HIV基因型耐药检测可为高效抗反转录病毒治疗(HAART)方案的选择和更换提供指导。
HIV-1/2抗体检测：
HIV-1/2抗体检测包括初筛试验和补充试验。
初筛试验的宗旨是避免漏检，本着"宁可错杀一千，也不放过一个”的原则，一般选用敏感性高的符合国家要求的高质量试剂，且必须为HIV-1/2混合型;缺点也就是容易产生假阳性结果。
补充试验包括确诊试验及核酸试验，确证试验主要包括免疫印迹试验（WB），条带/线性免疫试验（RIBA/LIA）。核酸试验包括核酸定性和核酸定量试验。补充试验是通过检测样本中是否存在艾滋病病毒抗体、抗原或者核酸而确定艾滋病病毒感染的检测方法。其检测结果都是可以作为判定是否感染艾滋病病毒的重要依据。
初筛试验：
HIV-1/2抗体初筛试验方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光或免疫荧光试验（CIA/IFA）、快速检测(RT)。
1．快速检测
HIV检测最常用方法，主要检测体内产生的用于抵抗HIV的抗体。该方法操作简便快速，结果容易判定，因此广泛用于门诊、急诊及检测点等，常用的类型为免疫渗滤试验（胶体金或胶体硒），明胶颗粒凝集试验、免疫层析试验等。一般医院检测样本基本上采用是血液。而一些快速检测点样本包括口腔液体（不是唾液）和尿液。
2．酶联免疫试验（ELISA）
ELISA有几种类型，主要为双抗原夹心法测抗体，双抗体夹心法测抗原，间接法测抗体，竞争法、捕获包被法。
试验可使用血液（包含血清、血浆和滤纸干血斑）、尿液样品，多为HIV抗体检测试剂，HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体，HIV抗原/抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶标记的HIV抗原/抗体，加底物显色，用酶标仪测定结果。
3.化学发光或免疫荧光试验（CIA/IFA）
试验采用发光或荧光底物，可使用血液(包含血清和血浆)、尿液样品，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体。HIV抗原/抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶或荧光标记的HIV抗原/抗体，加发光或荧光底物，用发光或荧光仪测定结果。
补充实验：
补充试验常用的方法是免疫印迹试验WesternBlot（WB）。
WB采用间接法检测样品中的抗HIV-1/HIV-2特异性抗体。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的HIV-1蛋白分离开来，然后再把这些分离的不同蛋白带转移到硝酸纤维素膜上（或PVDF膜）。将此膜切割成条状，每一膜条上均含有经电泳分离过的HIV抗原。待测样品经适当稀释后，加至硝酸纤维素膜上，恒温震荡，使其充分接触反应，血清中若含有HIV抗体，就会与膜条上抗原带相结合。加入抗人-IgG酶结合物和底物后，根据出现条带情况,按照试剂盒说明书判定标准，判断待测样品为阳性、阴性或不确定。
WB是目前特异性、敏感性均比较好的证实HIV感染的方法。也是国内HIV确认的首选方法，它是在DNA印迹术的基础上发展而来的新型技术。据报道，WB试验有2％的假阳性，多见于伴有自身免疫性疾病或打过疫苗的患者。如果将EIA和WB结合起来进行HIV特异性抗体检测,可以将检测结果的准确率提高至99％，假阳性率0.0006%。
另外，还有抗原检测和核酸检测用于HIV感染早期，抗体未出现时诊断。
抗原检测用ELISA检测P24抗原,在HIV感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太少,阳性效果通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原，来提高敏感性。
核酸检测用PCR法检测HIV基因，具有快速、高效、敏感和特异等优点，目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中。
筛查报告及流程：
HIV抗体筛查试验呈阴性反应可出具HIV-1/2抗体阴性报告，见于未被HIV感染的个体，但处于窗口期的新近感染者筛查试验也可呈阴性反应。
HIV抗体筛查试验呈阳性反应，必须进行复检，复检一般采用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的试剂进行重复检测，或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行重复检测，如两种试剂复测均呈阴性反应，则为"HIV抗体阴性"；如有一种或两种试剂呈阳性反应，需进行HIV抗体补充试验。报告为“HIV感染待确定”，不能出具阳性报告。
若补充试验无HIV特异性条带产生，报告HIV-1/2抗体阴性。补充试验出现HIV-1/2抗体特异带，但不足以判定阳性，报告HIV-1/2抗体不确定，可在4周后随访；如带型没有进展或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间发生带型进展，符合HIV抗体阳性判定标准则为HIV抗体阳性，如带型仍不满足阳性标准，继续随访到8周。如带型没有进展或呈阴性反应则报告阴性；满足HIV阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳性标准可视情况决定是否继续随访。经补充试验HIV-1/2抗体阳性者，出具HIV-1/2抗体阳性确认报告，并按规定做好咨询、保密和报告工作。对于有明确HIV流行病学史且筛查试验阳性，补充试验不确定者可尽早行HIV核酸定定量检测以帮助确诊。
了解完艾滋病的检测方法，另一个受到大家关注的问题来了，“窗口期”是什么？
什么是艾滋病“窗口期”？
艾滋病“窗口期”是从艾滋病毒进入人体起，到病毒激发人体免疫系统，促使血液及某些体液产生足够量的，能用现有医学检验方法检测出的艾滋病毒抗体的时间，在此期间抗体检测呈阴性，这段时期称为窗口期。
为什么会有窗口期？
HIV是单链RNA病毒，以侵入CD4+淋巴细胞的方式进入人体后首先以单链RNA为模板，在逆转录酶的作用下合成DNA；再以单链DNA为模板，在DNA聚合酶的作用下合成双股DNA，至此以后，HIV病毒成功与宿主染色体合为一体，感染了病毒的细胞开始疯狂的复制，其速度是爆炸性的，相当的快，感染者产生病毒血症，并可出现衣壳抗原p24的表达，临床表现为急性HIV感染症状。由于HIV的细胞内大量复制，导致CD4+淋巴细胞损伤、死亡，CD4+T细胞明显减少。然而在机体的免疫作用下，CD8+CTL活化，杀伤HIV感染细胞，同时产生抗HIV抗体，病毒血症3被清除，CD4+淋巴细胞数量回升。
因此，在HIV感染后，最先检测到病毒的RNA，然后是P24抗原，最后是抗体。
艾滋病“窗口期”的时间：
“窗口期”的长短个体有差异。根据中国艾滋病防治最高机构——卫生部艾滋病预防与控制中心临床病毒最新研究成果显示，窗口期是2—6周，保守些8周。
艾滋病“窗口期”的特点：
在“窗口期”，虽然感染者体内已经有了HIV，但相对应的抗体尚未产生出来，因此HIV感染者的血液中HIV抗体检测结果呈阴性。这就给及时诊断是否感染带来困难。
因此，有过高危行为如输血、吸毒和不洁性行为等有有类似感冒的表现，比如发热、皮疹、淋巴结肿大等，尽管查不到抗体，也有可能处于艾滋病“窗口期”，不能放松警惕，应3个月后再查一次，如果2次均为阴性，才可排除感染HIV的可能。
"窗口期"应该怎么查？
HIV侵入人体，该患者已经成为HIV感染者，但必须等待血液内抗体足够量才能在普通医院门诊的艾滋病筛查中检出，“窗口期”患者未出现抗体或者抗体量不足，惟一的办法就是直接检测患者体内的病毒或其抗原成分。目前，可采用的方法是测定HIVRNA（核酸定量）或P24抗原。
艾滋病普查为什么不直接用HIV核酸检测？
一个检测项目的推广要考虑到成本、普及性、应用需求等综合因素，目前在国内应用最广泛的是抗体检测。一些快速检测试剂，如血液快检，尿液快检和唾液快检，也属于抗体检测的范畴。值得提到的是，各国艾滋病检测相关的研究人员在提高检测敏感性和特异性的路上，一直在做着卓越的努力，抗体检测技术本身也在不断的发展，目前已经发展到第四代试剂，检测窗口期的时间从第一代试剂的最少50天左右，缩短到如今的最少15天左右。
普通群众如何应对艾滋病“窗口期”
艾滋病是有阻断药的！
艾滋病是有阻断药的！
艾滋病是有阻断药的！
有过输血、吸毒和不洁性行为等高危行为时，72小时内可以立刻前往附近的医院、诊所、红十字会开PEP（阻断药）服用，阻断概率95%，用药后因个人体质不同会有不同程度的副作用，切忌停药！
到了窗口期，感染者体内已经有了HIV，虽然血液中检测不到病毒抗体，但是同样具有传染性，甚至感染者体内的HIV数量会在这时达到一个峰值，导致传染性极强。急性感染期也出现在这段时间，因此缩短窗口期，及早发现感染者，对于控制HIV流行有重要的作用。
因此，有过高危行为如输血、吸毒和不洁性行为等后有类似感冒的表现，比如发热、皮疹、淋巴结肿大等，尽管查不到抗体，也有可能处于艾滋病“窗口期”，不能放松警惕，应3个月后再查一次，如果2次均为阴性，才可排除感染艾滋病的可能。
输血安全有保障吗？
“输血染艾滋”的医疗风险是低概率事件，其实大家不需要恐慌，输血还是相对安全的。1998年10月1日我国《献血法》生效，建立了无偿献血制度，血液的采集、检测、制备过程已能够最大限度地保证用血安全。
更重要的是，中国科研人员一直在致力于研究如何减少窗口期感染风险，研发了通过核酸检测的方法来缩短窗口期，降低包括艾滋病、肝炎等通过输血感染疾病的风险，近年来一直在进行试点推广。
在今年11月23日，国家卫健委召开例行新闻发布会，介绍我国艾滋病防治工作进展有关情况。国家卫生健康委员会疾控局副局长王斌说，经过多年努力，我国艾滋病防控政策日益完善，“政府组织领导、部门各负其责、全社会共同参与”的工作机制已经建立，防治经费逐年增加，服务网络更加健全，科技支撑作用不断显现，防控工作取得显著成效……艾滋病输血传播基本阻断。全面实施临床用血艾滋病病毒核酸检测全覆盖，经输血及使用血液制品传播病例接近零报告。
"抗体阴性"的艾滋病患者
HIV抗体检测为常见的艾滋病筛查手段，阳性一般意味着感染，阴性则代表未感染。这一判断是绝大多数人对艾滋病检测的“常识”。
但是，北京协和医院2017年刊载在国际专业学术杂志的一篇论文颠覆了这一“常识”。该论文公布了我国首例HIV抗体检测为阴性，但经HIV“核酸检测”为阳性确诊艾滋病患者，这也是世界首例成人HIV抗体阴性艾滋病合并肺卡波西肉瘤病例。
这一报道引起一部分"外行"人的恐慌:临床上这种情况是否普遍？艾滋病会有误诊或者漏诊的情况吗？艾滋病普查为什么不直接用HIV核酸发检测？
发布这例“阴性艾滋病”论文通信作者、北京协和医院感染内科李太生教授说过：“这个病例准确讲，应该是抗体阴性但核酸呈阳性的艾滋病。但是必须得注意，该病例仍然属于较特殊罕见病例情况，并不具有普遍性。更重要的是，随着技术发展艾滋，医学上有更精确核酸检测等技术，大众不需要害怕所谓检测不出的艾滋病，这是极其少见的情况，目前已有的检测手段，足够发现绝大多数艾滋病毒感染。”
也就说因技术门槛及成本等问题，核酸检测并不建议作为HIV／AIDS的常规筛查和诊断手段，但对于HIV早期感染但在抗体检查“窗口期”的人、临床上高度怀疑为晚期艾滋病但抗体检查阴性或者免疫蛋白印迹试验不确定的病例中推荐使用。
知艾防艾……
