主要内容 ? 梅毒实验室检测技术 ? 梅毒血清学试验检测技术进展 ? 梅毒实验室检测策略探讨 梅毒实验室检测技术 梅毒实验室检测的意义 ? 临床服务 筛查、确定现症梅毒患者;判断疗效。 ? 梅毒筛查 筛查梅毒感染者,尽早发现梅毒患者(保证安全用血 预防经血传播病原体和抗体) ? 流行病学监测 掌握梅毒流行趋势;了解不同高危人群的梅毒感染率 、发病率。 概述-梅毒病原体 ? 小而纤细的螺旋状微生物 ? 长5~20μm,粗细2年), 但妊娠时仍可传染给胎儿,病期越长,传染性越 小; 发病机理 ? 入侵途径 ? 在性行为过程中,苍白螺旋体通过皮肤或黏膜 微小损伤入侵机体,也能在妊娠过程中经胎盘 传给胎儿。 ? 感染的播散 ? 感染后数小时,在临床症状出现之前,梅毒螺 旋体经淋巴系统到达局部淋巴结,再经血流扩 散至全身 ? 梅毒螺旋体在梅毒的任何时期均有可能侵犯中枢 神经系统 梅毒体液免疫 ? IgM抗体 ? 感染梅毒后梅毒患者,首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体 ,感染2周后即可测出 ? 早期梅毒治疗3-9个月后,或晚期梅毒治疗2年 后,大部分病人IgM抗体转阴 ? 再感染梅毒时, IgM抗体又重新出现 ? IgM抗体出现是活动性梅毒表现 ? IgM抗体不能通过胎盘 ? 胎儿在宫内感染梅毒螺旋体抗体后,在胚胎晚期 (6-9个月)能合成IgM抗体 ? 新生儿或婴儿检出 IgM抗体是诊断先天梅毒证 据 梅毒体液免疫 ? IgG抗体 ? 感染梅毒第4周后产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体 ? IgG抗体可以持续存在:梅毒治疗后,梅毒螺 旋体抗原消失很长时间, IgG抗体仍可继续产 生,甚至终生可以检出 ? IgG抗体能通过胎盘 ? 新生儿出生后第3个月开始形成IgG抗体 梅毒体液免疫 ? 反应素(reagin) ? 梅毒螺旋体破坏人体组织,在体内释放一种 抗原性心磷脂,能刺激机体产生反应素 ? 反应素是具有抗体性质的物质,能与从牛心 中提取的心磷脂发生抗原-抗体反应 ? 反应素一般在感染后5-7周产生(或硬下疳出 现后2-3周产生) ? 反应素在治疗后可以逐步消失 ? 检测反应素可以评价治疗效果 概述-梅毒的诊断 ? 梅毒的诊断必须依靠病史、症状及实验检查进行综 合分析。
? 梅毒的实验室检查结果对诊断有决定性意义。 常用梅毒实验室检测方法 ? 病原学检测 ? 血清学检测 病原学检查 ? 原理:一期、二期梅毒时,取硬下疳、 扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液 或淋巴结穿刺术得到的组织液,在暗 视野显微镜下,光线从聚光器的边缘 斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮 光,从而可根据其特殊形态和运动方 式进行检测。 ? 方法:病原学检查的主要方法有暗视 显微镜检查、镀银染色法和直接荧光 法 病原学检查的临床意义 ? 病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体, 在临床可确诊梅毒,且具有快速、 方便、易操作的特点。 ? 螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的 最佳方法,对于患者的早期诊断、 及时治疗、预后和尽早切断传染源 都有十分重要的意义。 ? 如未见到梅毒螺旋体,并不能排除 患梅毒的可能性, 梅毒血清学检测方法 14 梅毒实验室检查分类 ? 暗视野显微镜检查 ? 梅毒血清学试验 ? 非梅毒螺旋体抗原血清试验 ? 梅毒螺旋体抗原血清试验 ? 脑脊液检查 ? 其它检查 ? 直接荧光抗体检查:免疫荧光染色检查 ? 病理检查 ? 聚合酶链式反应(PCR) ? 蛋白质印迹(Western blot) 暗视野显微镜检查 ? 苍白螺旋体可以通过普通光学显微镜观察到, 暗视野中可以通过典型特点确定,包括螺旋外 形,10~14个螺旋,螺旋状运动方式,6-20 微米长度。
? 一期梅毒硬下疳的溃疡渗出物有大量的梅毒螺 旋体 ? 二期梅毒肛周及外阴部的扁平湿疣表面分泌物 中都有大量的梅毒螺旋体 ? 以玻片压片后,滴加生理盐水,在暗视野显微 镜下可看到呈螺旋状、活动的螺旋体 暗视野显微镜检查 ? 暗视野检测的优点 ? 可立即确诊(在一期和二期梅毒) ? 快速检测 ? 暗视野检测的缺点 ? 需要有经验的专业镜检人员和专业设备(除特殊实验 室外一般不具备) ? 易与其他致病性和非致病性的螺旋菌混淆,一般不推 荐用来检测口腔皮损,因为口腔中存在非致病性的螺 旋菌 ? 必须立即镜检,因为螺旋体的运动性对确诊有重要价 值,随着皮损愈合,暗视野检测的敏感性降低 ? 局部使用香皂,水以及抗生素软膏等会增加假阴性的 可能性 梅毒血清学试验 ? 一般硬下疳出现2-3周才开始出现, 7-8周后全部阳性,故早期血清反应 常是阴性 非梅毒螺旋体抗原血清试验 ? 性病研究实验室试验(VDRL) ? 不加热血清反应素玻片试验(USR) ? 快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) ? 甲苯胺红试验(TRUST) ? 这些实验检测非梅毒螺旋体抗体(反应素):IgM和 IgG抗体 非梅毒螺旋体抗原血清试验 ? 非梅毒螺旋体抗原血清实验的滴度通常与病情活动相关梅毒患者, 滴度改变四倍或者稀释度改变两倍(例如,从1:16到1 :4或者1:8到1:32)具有临床意义。 ? 在同一患者进行连续的血清学检测需采用同一种方法(例 如,VDRL或RPR),并在同一实验室进行。 ? VDRL与RPR的结果均有效,但两者结果不能直接比较, 因为RPR的滴度一般比VDRL的滴度稍高,TRUST结果与 RPR相当,