HIV病毒与艾滋病实验室检测 白求恩国际和平医院检验实验中心贺政新 生命的渴望 * HIV病原学 中文名称: 人类免疫缺陷病毒 英文名称: human immunodeficiency virus;HIV 定义: 引起获得性免疫缺陷综合征和相关疾病的RNA病毒。 病毒主要侵犯CD4 T细胞、CD4单核细胞和B淋巴细胞。 Introduction HIV病毒结构模式图 HIV病原学 Structural proteins 病毒基因组是两条相同的正股RNA,每条RNA长约9.2-9.8kb。 编码了至少9个蛋白,可分为三类:结构蛋白、调控蛋白、辅助蛋白。 结构蛋白Gaggag基因产生55kD的蛋白p55:p17基质、p24衣壳、p9核衣壳、p6。PolGag-Pol融合蛋白 :p10蛋白酶、p50逆转录酶、p15 RNA酶H及p31整合酶。EnvEnv起先是160kD的蛋白 :gp41与gp120 。 调控蛋白 辅助蛋白 HIV病原学 HIV structure & life cycle HIV病毒感染病程 现已证实HIV感染可分为4个阶段,但不是 所有感染HIV的患者都一定经历这4个阶段。
①HIV感染的急性初期; ②HIV感染的慢性无症状期; ③HIV感染的症状期; ④晚期,称为AIDS。 艾滋病实验室检测 目前检测HIV的方法有100多种hiv病毒,总体来说可以分为两大类:抗体检测病毒检测细胞培养(病毒分离)p24抗原检测病毒核酸检测 早期对HIV的诊断主要是通过血清学试验检测抗HIV的抗体,间接地诊断HIV感染。 血清学试验分为初筛和确认试验。 最常用的初筛试验:酶联免疫吸附试验(ELISA) 最常用的确认试验:免疫印迹试验(WB)。 艾滋病实验室检测:血清学试验 HIV病毒感染后血清学动态变化 HIV病毒感染窗口期 Window Period 艾滋病窗口期是针对艾滋病检测的标志物而言hiv病毒,并非一个 笼统的概念。 人体感染HIV后,一般需要2-3周,最多6周左右血液中才可检测到HIV抗体或者HIV抗原。因为从感染HIV到机体产生抗体的这一段时间检测不到HIV抗体或者HIV抗原,故称之为窗口期,又叫做空窗期,是英文Window Period的翻译。值得注意的是,感染艾滋病病毒的个体在窗口期内同样具有传染性。 在病毒感染后3个月,大多数患者的血清学试验为阳性。
尽管有报道有感染1年后才出现血清阳性化,但实际上,所有患者都是在6个月内出现血清的阳性转化。 HIV病毒感染窗口期 Window Period HIV病毒感染窗口期 Window Period 艾滋病实验室检测:ELISA 试剂分代情况: 第一代HIV诊断试剂原理为间接ELISA法,所用的包被抗原为体外培养的HIV裂解物,含有很多杂抗原,主要HIV结构和表达蛋白浓度不能保证,灵敏度和特异性不高,出现许多假阴性和假阳性 第二代使用基因重组或合成多肽抗原,利用间接ELISA原理,窗口期比第一代诊断试剂缩短了约20天,灵敏度和特异性也有所提高。在一次试验中可同时检测HIV-1和HIV-2抗体 。 第三代利用双抗原夹心法检测标本中的抗体,酶标记物改为特异性HIV抗原,检测HIV-1、HIV-2和HIV-10抗体 。 第四代HIV诊断试剂是一种HIV-1/HIV-2抗体与HIV-10亚群抗体及p24抗原的联合检测方法。 艾滋病实验室检测:ELISA 艾滋病实验室检测:确证试验WB 结果判读 艾滋病实验室检测:病毒载量测定 病毒核酸提取逆转录PCR *