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hiv HIV检测方法 (转载)

阅读数:            发布:2020-11-01

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目前国际上HIV抗体常规筛查的主流试剂是以双抗原夹心法为原理的第三代试剂,它与第1、2代HIV诊断试剂不同,可同时检测所有类型抗体,提高了试剂的敏感性,同时特异性也得到了提高,且比第2代试剂对HIV感染的检测平均提高5天。第4代HIV诊断试剂是将HIV抗原和抗HlV-1 p24抗体同时包被载体,可同时检测样本中的HIV-1 p24抗原和Hlv抗体,因此该类试剂可以检出HIV-1 p24抗原阳性但抗体还未阳转的HIV感染的“窗口期”样本,从理论上讲,第四代试剂检出Hlv感染的时间要早于第三代试剂。国外有文献报道第4代HIV试剂可进一步将“窗口期”缩短4~5天。重庆医科大学附属第二医院皮肤科李聪颖

第一代试剂

使用HIV全病毒裂解物为抗原,应用间接法原理检测HIV抗体。如日本富士公司生产的HIV-PA试剂。

第二代试剂

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使用在细菌或真菌中表达的人工重组或化学合成多肽HIV抗原,应用间接法原理检测HIV抗体。基因重组通常易于在培养基中生产大量同源性抗原,产品为单一目的基因而非多样性抗原混合,特异性高于第一代试剂。

第三代试剂

使用合成多肽HIV抗原(少数用重组抗原),应用双抗原(或双抗体)夹心法原理检测HIV抗体(或抗原)。由于标记HIV抗原可同时检测血清中HIV-1 IgG、IgM、 IgA抗体,此类试剂的敏感性和特异性均优于标记抗人免疫球蛋白的间接法。

第四代试剂

此类试剂在第三代试剂盒基础上,将针对P24抗原的抗体与HIV-1抗原一起包被固相载体,可同时检测HIV-1 IgG、IgM、IgA抗体和P24抗原。

检测方法

A.医疗卫生部门常用的检测方法:

1、 酶联免疫吸附法(ELISA):通常用于初筛,便宜,大多采取血液检测,也有使用唾液和尿液的,实际检测通常需要三到四个小时,结果分为“阳性”或“阴性”。其准确度高达99.5%,但敏感性高于特异性——这意味着在极少数检测的结果是不准确的,而其中假阴性又是极其罕见的。这又意味着:只要确实过了窗口期,而且操作正确,阴性的检测结果是十分可信的。由于ELISA的敏感性高于特异性,其他病原体的感染或者操作的不规范也会造成阳性的结果——称为“假阳性”。所以阳性的初筛结果需要用同样的样本进行重新检测,或者用其他方法进行确诊。

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2、快速检测法:对血液或口腔黏膜进行取样,检测HIV抗体,20-40分钟即可得出跟ELISA一样十分准确的结果。在试剂可靠操作规范的情况下,其错误率仅为千分之一至千分之三。(注意:不要因此以为唾液、接吻、共用餐具就可传播HIV)。跟ELISA一样,快速检测的结果如果呈阳性,也需要进行确诊检测。

3、免疫印迹法(Western Blot):只用于对初筛呈阳性的案例进行确诊检测,有三种结果,“阳性”hiv,“阴性”和“不确定”。“不确定“通常发生在受测者的身体刚刚对病毒产生免疫反应的时候。在免疫印迹法的结果中,假阳性是极其罕见的。

4、间接荧光抗体试验(IFA):也用于对初筛呈阳性的案例进行确诊检测,但不是很常见。其方法是用显微镜来找到血液中的HIV抗体。

B.抗原检测:抗原是入侵病原体携带的某种能激发人体产生抗体的物质。HIV携带的抗原通常是P24蛋白。在感染初期,它们在血液中的含量会急剧上升从而能被检测到。但HIV病毒在人体里安家落户之后它又检测不到了。所以这种方法常跟抗体检测一起用于捐献血液的HIV检测。

C.聚合酶链反应检测(PCR):核酸扩增试验指的是释放基因物质并用聚合酶链反应检测。PCR用于直接检测HIV的核酸物质,在感染两至三周内就能从血液中检测出HIV病毒。这种方法还可以用于测试血液中的病毒含量,为治疗提供依据。但是它既昂贵又复杂。

这对检测者来说意味着:

在试剂可靠、确定已过窗口期的情况下,初筛的阴性结果(ELISA和快速检测法都算)是十分可靠的。一次检测就已足够。初筛的阳性结果需要通过确诊检测来排除假阳性,确诊结果也是十分可靠的。

有条件的受测者可以选择C、D两种方式进行检测hiv,以求更准确,更及时地了解自身状况,但这昂贵且不易获得。而且最终确诊感染仍需通过抗体检测。

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